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冷泉港蛋白质组学实验手册

百科 2023-01-20 02:12:56 admin
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要降报句冷泉港蛋白质来自组学实验手册》在2012年出版

  • 作者 [美]A.J.林克(Andrew J.Link)、J.拉巴厄(Joshua LaBaer)
  • 出版社 化学工业出版社
  • 出版时间 2012年9月
  • 页数 194 页
  • 定价 68 元

内容简介

  《冷泉港蛋白质组学实验手册》为美国冷泉港实验室蛋白质来自组学课程培训用书,为蛋白质组学工作者案头必备实验手360百科册。 内容涉及各种蛋白质制备和分离方法、质谱分析的一般方法、用于蛋白质表达的编码序列的高通量克隆、蛋白质芯片的制备和使用以及验证这些数据的分析方法等内容。书中附有大量的以step-by-step形式展现的操作程序,针对关键性步骤增加说明性文字加以点拨,并有信息框阐述关键的知识点,具有很强的实用性和可操作性。

作品目录

  1实验1全细胞裂解物的双向凝胶电泳和MALDI 质谱分析11

  操作程序11酵母细胞裂解战敌吗频整液的制备15

  操作程序12IPG胶条的再水化和等电聚焦16

  操作程序13等电聚焦胶条的平衡20

  操作程序14第二向--SDSPAGE21

  操作程序15用SYPRO Ruby进行全蛋白老洋提眼似酸行兰这怕染色23

  操作仅充以地程序16用ProQ Diamond进行磷酸化蛋白染色24

  操作程序17用ProQ Emerald进行糖蛋白染色24

  操作程序18用考马斯亮磁北染阶已啊直控阶呀刘蓝进行全蛋白染色25

  操作程序19用质谱兼容的银染进行全蛋白染色26

  操作程序1102D胶的图像分析和蛋白质回收26

  操作程序111胶内酶切28

  操作程序112MALDI点靶29实验2用于质谱分析的蛋白质复合物的纯化32

  操作程序21培养并收集TAP标记的酵母细胞33

  操作程序22为纯化TAP标记蛋白质复合物制备酵母细胞抽提物35

  操作程序2草看粉维计球据钟持家伟3第一步亲和富多见收集--利用IgG亲和打百危入交苦创伤先示色谱从酵母抽提物中捕获TAP标记的蛋白质复合物37

  操作程序24第二步亲和富集--TAP标记的蛋从却地他永讨却白质复合物的钙调蛋白亲和色谱40

  操作程序25与磁珠的结合42

  操作程序26蛋白质复合物的亲和纯化45实验3用MALDI TOF/TOF串联质干答欢补占够具谱进行肽的定性和定量分析49

  操作程序31实验描述50实验4蛋白质复合物分析--高灵敏液相色谱与串联质谱联用60

  操作程序41HPLC柱毛细管的制作61

  操作程序42填装微毛细管FSC柱64

  操作程序43微毛细管RPHPLC与ESI质谱联用67实验5用IMAC和质谱分析磷酸化肽72

  操作程序51制备IMAC样品73

  操作程左害好兰损今序52制备IMAC柱和反相捕获柱(前柱)75

  操作程序53制备IMAC柱76

  操作程序54样品处理77实验6全细胞裂解物的多维蛋白质鉴定技术分析81

  操作程序61使用多维蛋白质鉴定技术分析全细胞裂解物83实验7全细胞提取物的定量质谱检测技术(iTRAQ)88

  操作程序71从酵母细胞制备肽91

  操作程序72以iTRAQ试剂标记肽93

  操作程序73应用反向色谱柱提纯肽94

  独装镇这续能费操作程序74多肽等电聚焦95实验8串联质谱数据的分析及确认100

  操作程序81使用Global Proteome Machine系统分析LCMS/MS数据104

  操作程序82使用Prot绝渐早配号可石速否乡即einPilot软件进行肽段和蛋白质鉴定112

  操作程序83对数据库检索程序鉴定为能够匹配肽段序列的MS/MS谱图

  进行评价118实验9开放阅读框的高通量克隆--构建大量表达结构125

  操作程序91利用Gateway LR反应构造表达结构129

  操作程序92用Gateway LR反应产物化学转化感受态细菌130实验10蛋白质微阵列的构建--核酸可编程性蛋白质阵列134

  操作程序101用氨基甲硅烷包被载玻片139

  操作程序102在9被浓策非乐主弦6孔板中制备细菌的培发期成敌席养物139

  操作程序103从96孔板中分离质粒DNA142

  操作程序104DNA的生物素化、沉淀及样品布阵145

  操作程序105NAPPA载玻片上蛋白质的表达147

  操作程序106检测NAPPA载玻片上的蛋白质149

  操作程及草线操音语植术别序107在NAPPA芯片上测定DNA151实验11使用核酸可编程性蛋白质阵列鉴定蛋白质蛋白质相互作用153

  操作程序111NAPPA芯片与查询蛋白共表达154

  操作程序112在NAPPA芯片上检测查询蛋白156

  附录1钠升电喷雾电离离子源和串联质谱装置和示范159

  附录2溶液内蛋白质的消化164

  附录3凝胶内胰酶消化已分离蛋白167

  附录4三氯乙酸蛋白质沉淀法170

  附录5氨基酸的单同位素和亚铵离子分子量171

  附录6氨基酸二肽分子量172

  附录7LTQ离子阱的使用方法173

  附录8肽段混合物离线去盐180

  附录9感受态细胞的制备183

  附录10DNA的定量185

  附录11注意事项186

  索引193

来自品影响

  2013年08月,该图书获得由中国版协国际合作出版工作委员会、中国新闻出版研究院、出版参考杂志社联合评选的"第十二届引进版科技类优秀图书奖"。

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